FAS活性測定中標準曲線的建立是實驗的核心環節，直接關系到結果的準確性。
一、標準曲線建立步驟
?標準液濃度選擇?
建議選擇5種濃度，覆蓋待測樣品的可能變異范圍，濃度差距最好成倍或等級增加。
例如：0.8 IU/ml、4 IU/ml、20 IU/ml、40 IU/ml、50 IU/ml（參考ELISA試劑盒檢測范圍）。
?標準液測定?
每個濃度點至少重復2次，讀取光密度（OD值）并取平均值，以減少儀器誤差。
?標準曲線繪制?
以標準物濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪制標準曲線。
若符合Lambert-Beer定律，曲線應通過原點且為直線；若點不在一直線，可通過原點盡可能使直線通過更多點，使點均勻分布在直線兩側。
二、標準曲線核心要求
?濃度范圍?：應覆蓋正常操作條件下的被測量范圍。
?標準樣品組分?：盡量與被測樣品組分一致，減少基體干擾。
?濃度分布?：標準樣品濃度值應等距離的分布在被測量范圍內。
?重復性?：每個標準點至少重復2次，從稀釋開始。
三、注意事項
?儀器與試劑?：更換儀器、移動位置、調換試劑或室溫明顯改變時，需重新繪制標準曲線。
?標準曲線保存?：繪制好的標準曲線僅適用于相同條件下操作測定相同物質時使用。
?結果計算?：以標準物活性為橫坐標，OD值為縱坐標，繪制標準曲線，根據樣品OD值查得活性，再乘以稀釋倍數。
四、示例標準曲線參數
?檢測范圍?：0.8 IU/ml - 50 IU/ml。
?線性回歸?：樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值應≥0.99。
?批內與批間差異?：批內CV值應<9%，批間CV值應<15%